關于血清的保存條件,這是一個非常重要且常見的問題。正確的保存是保證血清質量和細胞培養實驗成功的關鍵。
以下是血清保存條件的詳細說明,主要針對最常見的胎牛血清,其他類型血清(如小牛血清、馬血清等)也適用類似原則。
一、血清保存的核心原則:避免反復凍融
反復凍融是損害血清質量的最主要因素。它會導致:
蛋白質變性、沉淀。
營養成分降解。
生長因子活性喪失。
增加沉淀物的形成。
二、血清的建議存儲溫度與解凍
1.儲存:建議將血清儲存在-15℃~-20℃。
Ps:已開封血清的保存
最佳實踐:分裝!分裝!分裝!
這是保護血清活性最有效的方法。收到血清后,在首次解凍后立即進行無菌分裝。
分裝體積:根據您每次實驗的常用量(如 50mL/管),確保每管能在短時間內用完。
儲存:將分裝好的血清立即放回-20°C或-80°C冷凍。使用時取出一管,其余血清仍處于未解凍狀態。
2. 解凍:不建議于4℃過夜解凍,也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍,因為若血清沒有混勻,底部的蛋白會變性形成沉淀。
血清解凍的方法(三步法)
三、 可能出現的問題:血清沉淀物
血清在儲存和解凍過程中出現沉淀是常見現象,主要有:
脂蛋白聚合物:顯微鏡下可見的小黑點,通常不影響細胞生長。
磷酸鈣結晶:外觀像白色碎片或絮狀物,可能影響細胞生長。
纖維蛋白:肉眼可見的絮狀沉淀。
如果沉淀量不多,無需特別處理。如果量多,建議過濾后使用。
四、總結:最佳操作流程
收貨檢查:收到血清后,檢查包裝是否完好,立即根據計劃儲存于-20°C。
首次處理:使用時,從冰箱取出,置于4°C 過夜解凍。
立即分裝:解凍后,在超凈工作臺中進行無菌分裝至多個小體積無菌離心管中。

冷凍儲存:將分裝管立即放回-20°C冷凍。
日常使用:每次實驗取出一管分裝血清,在4°C解凍或室溫水浴快速解凍后使用。已解凍的血清如在1個月內不能用完,建議丟棄或重新過濾后4°C短期保存。
遵循以上保存條件,可以最大限度地維持血清的生物學活性,確保您的細胞培養實驗結果穩定可靠。